Técnica Histológica
Preparados histológicos. Pasos.
1. Obtención de la muestra
Biopsia
Autopsia
2. Fijación
Fijadores físicos:-Desecación.-Calor seco. -Calor húmedo.-Frío.-Congelación
Fijadores químicos
Simples:-Formol (al 10%): más usado. Compuesto por metanal y agua. Buen fijador para lípidos.-Alcohol etílico (70-90%): fijador por deshidratación. buen fijador para el glucógeno. -Alcohol metílico: buen fijador de frotis desecados (sangre, médula ósea, ganglio, líquidos de punción).-Ácido ósmico (1-2%): poco penetrante pero enérgico. buen fijador de estructuras celulares. -Glutaraldehído (0,5-3%): buen fijador de membranas.
Compuestos:-Líquido de Fleming: cromo-osmio-acética.-Líquido de Zenker: bicromato-sublimado-acética.-Líquido de Helly: Zenker-formol.-Líquido de Bouin: picro-formos-acética.-Líquido de Duboscq-Brasil o Bouin alcohólico.
3. Elaboración del bloque de parafina
Deshidratación
Extracción del agua con alcoholes
Aclaramiento
Extracción del alcohol con xilol
Impregnación del bloque de parafina
Sustitución del xilol por parafina líquida (60 grados)
Elaboración del bloque de parafina
Colocación de la parafina con la muestra en un envase y dejarlo a temperatura ambiente (parafina sólida)
4. Corte
Micrótomo: corta rebañadas delgadas (de 4 a 8 micrómetros)
5. Montaje
Baño de María (para extender el tejido)
Lámina portaobjetos
Eliminar la parafina
6. Coloración
Colorantes básicos: atrae componentes cargados negativamente. El más usado es hematoxilina, la cual tiñe el núcleo de la célula.
Colorantes ácidos: atrae componentes cargados positivamente. El más usado es la eosina, la cual tiñe proteínas contenidas en el citoplasma.
7. Cubre-objetos
Bálsamo de Canadá o Mountec (conservador del tejido)