Técnica Histológica

Preparados histológicos. Pasos.

1. Obtención de la muestra

Biopsia

Autopsia

2. Fijación

Fijadores físicos:-Desecación.-Calor seco. -Calor húmedo.-Frío.-Congelación

Fijadores químicos

Simples:-Formol (al 10%): más usado. Compuesto por metanal y agua. Buen fijador para lípidos.-Alcohol etílico (70-90%): fijador por deshidratación. buen fijador para el glucógeno. -Alcohol metílico: buen fijador de frotis desecados (sangre, médula ósea, ganglio, líquidos de punción).-Ácido ósmico (1-2%): poco penetrante pero enérgico. buen fijador de estructuras celulares. -Glutaraldehído (0,5-3%): buen fijador de membranas.

Compuestos:-Líquido de Fleming: cromo-osmio-acética.-Líquido de Zenker: bicromato-sublimado-acética.-Líquido de Helly: Zenker-formol.-Líquido de Bouin: picro-formos-acética.-Líquido de Duboscq-Brasil o Bouin alcohólico.

3. Elaboración del bloque de parafina

Deshidratación

Extracción del agua con alcoholes

Aclaramiento

Extracción del alcohol con xilol

Impregnación del bloque de parafina

Sustitución del xilol por parafina líquida (60 grados)

Elaboración del bloque de parafina

Colocación de la parafina con la muestra en un envase y dejarlo a temperatura ambiente (parafina sólida)

4. Corte

Micrótomo: corta rebañadas delgadas (de 4 a 8 micrómetros)

5. Montaje

Baño de María (para extender el tejido)

Lámina portaobjetos

Eliminar la parafina

6. Coloración

Colorantes básicos: atrae componentes cargados negativamente. El más usado es hematoxilina, la cual tiñe el núcleo de la célula.

Colorantes ácidos: atrae componentes cargados positivamente. El más usado es la eosina, la cual tiñe proteínas contenidas en el citoplasma.

7. Cubre-objetos

Bálsamo de Canadá o Mountec (conservador del tejido)