MICROSCOPIA
Es la observación de pequeños objetos bajo grandes aumentos
Microscopio óptico
Inauguró la era de la microscopía en el siglo XVII
Basado en un conjunto de lentes y el uso de luz visible con el fin de aumentar la imagen de la muestra
Revisar de forma minuciosa la célula a una calidad 1000 veces mayor de la imagen original
sistema óptico
sistema mecánico
pasos
2. El espécimen debe estar preparado con sumo cuidado para que la luz pueda atravesarla.
Celulas vivas
1. Se enfoca la luz brillante sobre el espécimen mediante los lentes del condensador
3. Se alinea un sistema apropiado de lentes para enfocar una imagen del espécimen.
Microscopia Electrónica de Barrido (MEB)
Microscopio electrónico de transmisión (MET)
Microscopio confocal
Microscopia de fluorescencia
Utilizados para teñir células y se detectan con la ayuda de un microscopio de fluorescencia.
Similar a un microscopio óptico con la excepción de que la luz atraviesa dos sistemas de filtros.
Aquí observamos las sondas fluorescentes
Pasos
1. Filtra la luz antes de que alcance el espécimen y sólo deja pasar a los colorantes que causan una reacción en el fluorescente usado.
2. Bloquea la luz y solo deja pasar las longitudes de onda emitidas por el fluorescente.
Se ven los objetos teñidos de un color brillante sobre un fondo oscuro
Topic flotante
Los fluorescentes absorben la luz a una longitud de onda y la emiten a otra más larga
Pueden ser reveladas por un microscopio de fluorescencia cuando se unen a determinadas moléculas de las células
Construye una imagen por barrido del espécimen con un haz láser
Un orificio en el detector permite únicamente a la fluorescencia emitida desde un mismo punto sea incluida en la imagen
El barrido del haz por el espécimen genera una imagen muy definida en el plano
una serie de cortes ópticos en diferentes profundidades hace posible la construcción de una imagen tridimensional
Ejemplo
Este haz tiene como objetivo un solo punto a una profundidad determinada del espécimen
Cierta similitud a un microscopio óptico con la diferencia de que emplea un haz de electrones en lugar de un haz de luz
Además de bobinas magnéticas para enfocar el haz en lugar de lentes de cristal.
contraste se tiñe con metales pesados y seguidamente es introducido para que absorben o dispersen localmente electrones.
Son eliminados cuando el haz atraviesa la muestra
DATO IMPORTANTE
El MET tiene un aumento muy útil aproximadamente un millón de veces mejor
Además puede resolver detalles tan mínimos como 2nm.
Actúa cuando el espécimen es cubierto con una película muy delgada de metal para luego ser barridos por un haz de electrones a un foco por bobinas electromagnéticas las cuales actúan como lentes en dichos microscopios.
Además la cantidad de electrones emitidos se mide por un cierto detector mientras el haz bombardea cada punto sucesivo de la superficie
La superficie del espécimen se mide mediante el detector y se la usa para controlar la intensidad de los puntos sucesivos en una imagen reconstruida en una pantalla de video.
usualmente
las imágenes son generadas a una calidad bien llamativa de objetos tridimensionales con gran profundidad de foco
los detalles de rango de estudio es de 2 a 20nm, esto dependiendo del aparato que se esté usando.
