Métodos de diagnostico viral

Inmunofluorescencia

Fundamento

Utiliza un fluorocromo para determinar la formación de un complejo antígeno-anticuerpo

Muestras

células descamativas, células tomadas a partir de
hisopado o escarificación, células tomadas de improntas y biopsias por congelación

Ejemplos a identificar

HSV-1 y HSV-2, VZV, CMV, EBV, virus influenza A
y B, virus respiratorio sincicial, metapneumovirus, virus parainfluenza, adenovirus, sarampión, parotiditis, rubéola y rabia

Inmunoensayo en fase sólida

Fundamento

Consiste en inmovilizar un antígeno afín a cierto antígeno para formar un complejo antígeno.-anticuerpo. la formación del conjugado se evidenciará por enzimas en conjugados

Muestras

fluidos corporales como sangre, orina, LCR

Ejemplos a identificar

Rotavirus, hepatitis B, VRS, citomegalovirus, coronavirus, Coxsackievirus e influenza

Aglutinación de látex

Se utilizan partículas de látex recubiertas con el anticuerpo especifico que se mezclan con la muestra, en presencia del antígeno viral se formará un acumulo

Muestras

Sangre

Ejemplos a identificar

Rotavirus, adenovirus y HSV

Inmunocromatografía

Fundamento

Después de realizar una EIA sándwich, posteriormente, el espécimen y conjugado migran por capilaridad hasta encontrar un anticuerpo de captura, el antígeno se une a él y el anticuerpo control da la reacción positiva

Muestras

fluidos corporales como sangre, orina, LCR

Ejemplos a identificar

virus respiratorio sincicial, virus influenza A y B y
adenovirus

Microscopia electrónica

Fundamento

se basa en la identificación morfológica del viriones

Muestras

Materia fecal, secreciones nasofaríngeas, lavado pulmonar, LCR, tejido cerebral

Ejemplos a identificar

Hepatitis B, papiloma humano y Parvovirus B19

Citología exfoliativa

Fundamento

Identificación de las lesiones por infección viral mediante el microscopio de luz

Muestras

lesiones
mucosas o cutáneas

Ejemplos a identificar

virus HSV, CMV y VZV

Aislamiento viral

Fundamento

Utilizar el tropismo viral para aislar el virus en animales, huevos embrionados o líneas celulares

Muestras

Depende de ña ruta de excreta del virus

Ejemplos a identificar

virus herpes simplex (HSV), citomegalovirus (HCMV), virus respiratorio sincitial (RSV) e influenza

Sondas genómicas

Fundamento

Sondas de ADN o ARN especificas a un grupo viral que forman híbridos marcados con enzimas o radiactivamente que son reconocidos por métodos colorimétricos

Muestras

toma de muestra sanguínea, biopsia,
tejidos incluidos en parafina, cultivo de tejidos, células presentes en exudados o líquidos
corporales (orina, LCR, secreciones respiratorias o genitales)

Ejemplos a identificar

Virus de papiloma humano, hepatitis B y citomegalovirus

Micro arreglos moleculares

Fundamento

Sondas de ADN se encuentran fijos, el ADN es amplificado con fluorocromos para después ser hibridado con sondas de patógenos conocidos lo cual es reconocido por un software

Muestras

tejidos, proteínas
y material genético)

Ejemplos a identificar

El virus de la rubeola, citomegalovirus y el virus
del herpes

Amplificación de A.N

RT-PCR

Fundamento

Permite identificar virus de RNA mediante una fase previa donde el ARN es retrotranscripto

Muestras

Sangre circulante y otros fluidos

Ejemplos a identificar

Virus de papiloma humano y VIH

PCR en tiempo real

Fundamento

Permite cuantificar mediante la medición de una señal fluorescente emitida por un fluoro foro donde la intensidad de la señal es proporcional al producto amplificado

Muestras

Sangre circulante y otros fluidos

Ejemplos a identificar

VIH, hepatitis, citomegalovirus y paramoxyvirus

PCR multiple

Fundamento

Permite la amplificación de diferentes secuencias en un mismo tubo

Muestras

Respiratorias, LCF, entéricas

Ejemplos a identificar

Influenza, Parainfluenza, coronavirus, adenovirus

Amplificación de desplazamiento múltiple

Fundamento

métodos de amplificación isotérmicos inspirados en el sistema transcripcional de virus usando transcriptasa inversa RT, ARN polimerasa T7 y ARNasa H

Muestra

Respiratorias, LCF, entéricas

Ejemplos a identificar

influenza, coronavirus SARS, y bocavirus humano